cDNA名詞解釋:cDNA(互補DNA)是一種互補的脫氧核糖核酸。與mRNA鏈互補的單鏈DNA，是在適當?shù)囊锎嬖谙?，由mRNA和DNA在一定條件下合成的，稱為cDNA。
一、cDNA簡介
cDNA是指具有與RNA鏈互補的堿基序列的DNA。與RNA鏈互補的單鏈DNA是由RNA依賴型DNA聚合酶(逆轉(zhuǎn)錄酶)在合適的引物存在下合成的，雙鏈cDNA是由DNA依賴型DNA聚合酶或RNA依賴型DNA聚合酶以單鏈cDNA為模板，合成單鏈cDNA并經(jīng)堿處理去除其對應(yīng)的RNA后合成的。這種情況下，mRNA的cDNA與原始基因組DNA相同，沒有內(nèi)含子；相反，它對應(yīng)于3 & # 39；其不存在于原始基因中，但存在于mRNA中。mRNA結(jié)構(gòu)與外顯子序列、前導序列和后續(xù)序列一起反映在核苷序列上，如聚腺苷酸序列。
二、制備cDNA
為了制備互補的DNA，通常需要首先分離從靶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA。如果這個基因編碼的蛋白質(zhì)是細胞中的主要蛋白質(zhì)，那么這個基因的產(chǎn)物就是總mRNA的主要成分。就胰島B細胞而言，這種細胞含有高水平的胰島素前體基因，有時會沉淀正在翻譯的基因的核糖核蛋白。如果表達的蛋白質(zhì)(抗原)與特異性抗體結(jié)合，胰島素特異性mRNA可以從沉淀的核糖體中分離出來，一般特異性mRNA只是細胞總mRNA的一小部分。在這種情況下，總的mRNA必須通過密度梯度離心根據(jù)分子量進行分離，然后將分離的mRNA直接用于在試管中表達蛋白質(zhì)(兔網(wǎng)織紅細胞的裂解物或小麥胚芽提取物用作翻譯系統(tǒng)的誘導劑)，然后通過免疫沉淀或聚丙烯酰胺凝膠電泳從許多表達的蛋白質(zhì)中確定目標蛋白質(zhì)，從而確定表達蛋白質(zhì)的特定mRNA。
三、cDNA克隆
cDNA cloing是與RNA互補的雙鏈DNA片段，可以攜帶在克隆載體中。常用來克隆真核生物的基因拷貝。由于cDNA外殼是信息分子的成熟拷貝，沒有內(nèi)含子序列。如果一個合適的運動序列與其克隆的集合相連，它可以在任何宿主中快速表達。
文章標題：cdna名詞解釋
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